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RNA pull down实验

  发布时间: 2022-04-15      浏览量:1324
RNA pull-down 蛋白,核酸蛋白相互作用,biotin探针,银染,质谱

           RNA pull-down是检测RNA结合蛋白与其靶RNA之间相互作用的主要实验手段之一。通过该实验可以富集并鉴定或验证与目标RNA有相互作用的蛋白质。RNA pull down 是使用体外转录法标记生物素RNA探针,然后与胞浆蛋白提取液孵育,形成 RNA-蛋白质复合物。该复合物可与链霉亲和素标记的磁珠结合,从而与孵育液中的其他成分分离。收集从磁珠上洗脱下来的蛋白质,可通过质谱和Western Blot来确定和验证与RNA互作的蛋白。  

RNA PULL DOWN.png

结果展示:

1.SDS-PAGE及银染图

银染图片 RNA pulldown水印版.png


2.质谱鉴定肽段图

质谱肽段-水印版.png


RNA pull-down服务优势:

1. 十年服务经验,客户成果发表在Cancer Cell,Cell Research, Cancer Research,Oncogene等高水平期刊上。

2.对围绕RNA结合蛋白开展的整体课题提供全方位指导,包括上下游实验设计和结合蛋白的多方法验证等

3.自有蛋白质组学平台,对RNA pull down产物这类微量蛋白的质谱鉴定有十足的把控能力,对后续的质谱分析有独到的见解

4.售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿


RNA pulldown实验外包服务样本要求

 1. 送样量要求:

样本类型
RNA pull down WB建议送样量RNA pull down MS建议送样量
动物细胞
3*10e7个细胞/组(约3个10cm皿)5*10e7个细胞/组(约5个10cm皿)
动物组织1g/组2g/组
植物叶片2g/组4g/组
植物根或果实4g/组8g/组
菌体50ul菌体沉淀/组100ul菌体沉淀/组


注意:这里列出的均为每组样本的送样量,如果实验和对照组用的样本一致,此样本量*2。详细送样指南可联系客服或销售索取。

2. 样本保存和运输要求:

(1)样本用PBS清洗干净后,离心去掉液体,先放入液氮中速冻,再转移至-80℃冰箱中保存;

(2)样本一定要做好标记,应用油性防冻记号笔或标签纸在管上注明样本名称或编号;

(3)样本较多或需要分批做,要将样本分装;

(4)干冰取样/运输;需要至少在送样前一天通知我方。



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